LAS MICORRIZAS:"hongo-raíz", una simbiosis muy importante

INTRODUCCIÓN:
Las micorrizas son órganos formados por la raiz de una planta y el micelio de un hongo. Funcionan como un sistema de absorción que se extiende por el suelo y es capaz de proporcionar agua y nutrientes (nitrógeno y fósforo principalmente) a la planta, y proteger las raices contra algunas enfermedades. El hongo por su parte recibe de la planta azúcares provenientes de la fotosíntesis. Existen miles de especies de hongos micorrícicos que forman esta simbiosis con los árboles. La mayoría de las familias de plantas superiores de la Tierra forman micorrizas.

Así nos encontramos con: Ectomicorrizas, Endomicorrizas o micorrizas arbúsculares, Ectendomicorrizas, Arbutoides, Monotropoides, Ericoides y Orquidioides. Aunque de todas ellas los dos tipos más comunes, más extendidos y las más conocidas son las ectomicorrizas y las endomicorrizas.

ECTOMICORRIZAS:
El hongo normalmente de micelio tabicado, forma un auténtico manto de hifas que rodea a la raíz. El desarrollo del hongo dentro de la corteza es intercelular, formando una especie de retícula llamada “red Hartig”.

RECONOCIMIENTO: Es fácil y a simple vista, sobre todo en Otoño y en Primavera, por la envoltura fúngica denominada “manto” que desarrolla el hongo alrededor de las raíces secundarias y cortas.
Además las raíces sufren una serie de modificaciones, las raíces laterales son más cortas, pierden los pelos absorbentes, se acortan los extremos y se ensanchan, y generalmente se ramifican.

ENDOMICORRIZAS: también denominado vesículo-arbusculares.
Los hongos siempre aseptados, las hifas atraviesan la pared de las células de la raíz, es decir se da una penetración intracelular, aunque no llegan a penetrar en m.plasmática.

RECONOCIMIENTO: No son visibles a simple vista, no producen cambios morfológicos en el exterior de la raíz, no forman manto ni red hartig. Para su estudio se ha de clasificar, teñir y hacer uso del microscopio.

ESTRUCTURAS:
Una vez que las hifas penetran dentro de las células, dan lugar a minúsculas arborescencias muy ramificadas que reciben el nombre de ARBÚSCULOS, que aseguran una gran superficie de contacto entre ambos simbiontes, y es donde se da la transferencia de nutrientes hongo-planta, son de vida efímera, de algunos días hasta algunas semanas, y terminan por ser digeridos por la planta huésped. Estas estructuras aparecen siempre.

En ocasiones también se presentan estructuras globosas o elisoidales llamadas VESÍCULAS, que contienen lípidos, sirven de sustancias de reserva, pueden ir intra o intercelular. Además el hecho de encontrarlas asociadas con raíces viejas o muertes sugiere que puedan desempeñar un papel como órgano en reposo o de propagación del hongo.

TAREA:

Se va a dividir en dos partes:

UNA PARTE TEÓRICA: Para ello se dividirá la clase en varios grupos (de 5-6 personas) asignándose a cada uno de ellos un tema relacionado con la micorrización, para así llevar a cabo su estudio y posterior desarrollo. Tendrán que realizar un trabajo escrito y luego exponerlo ante el resto de sus compañeros, ayudados de recursos tales como: power point, transparencias, diapositivas, fotos…

UNA PARTE PRÁCTICA: Que se llevará a cabo en el laboratorio, para ello se formaran grupos de 2-3 personas por microscopio, a los que se les dará raíces micorrizadas de maíz para que elaboren muestras para observar al microscopio las estructuras típicas de endomicorrizas (vesículas y árbúsculos).

PROCESO:

Para lo cual usaremos los siguientes materiales:

Tubos de ensayo
Placas de Petri
Portaobjetos y cubreobjetos
Bisturí
Pinzas
Microscopio
Aceite de inmersión
Papel milimetrado

Los pasos que tendrán que seguir son los siguientes:

PRIMER PASO: Procedimiento de limpieza. Se debe hacer especial hincapié en el lavado de raíces para eliminar los restos de tierra adheridos en ella, prestando atención de no dañarlas.
Posteriormente, se realiza un corte de la parte aérea de la planta, justo en el punto donde comienzan las raíces, para ser introducidas en el tubo de ensayo donde se realiza el siguiente paso del proceso.

SEGUNDO PASO: Procedimiento de aclarado. La finalidad de éste paso es conseguir favorecer la visualización de las vesículas y los arbúsculos del hongo, consta de cinco fases:

-La cubrición de las raíces con una solución KOH al 10%.

-El calentamiento de los tubos con las raíces durante un tiempo aproximado de 20 minutos, éste tiempo es variable en función del grosor de la raíz y el contenido de taninos.

-Enfriamiento de los tubos y la posterior eliminación de la solución, se vuelven a lavar las raíces con agua.

-En el mismo tubo, cubriendo la raíces, echamos una solución de HCl (0,1N), así se consigue neutralizar el KOH que haya podido quedar en la raíz.

-Dejamos actuar durante 2 minutos y eliminamos el líquido, repitiendo el proceso en el caso de que la raíz no haya quedado blanca, dejando actuar durante más tiempo el KOH al 10%.

TERCER PASO: Procedimiento de tinción. La finalidad de éste paso es conseguir teñir las hifas del hongo, para ello bañamos las raíces del tubo con el colorante Azul Tripán 0.05% en lactoglicerol y se calienta durante 5 minutos. Posteriormente se sacan los tubos y se dejan enfriar, añadimos el lactoglicerol para eliminar el exceso de colorante, mezclando bien hasta que salga y repitiendo la operación hasta que las raíces no tiñan el lactoglicerol.

Una vez obtenidas las muestras, se procede a su observación al microscopio, para ello se barren 10 cm de raíz por planta.

RECURSOS INFORMÁTICOS UTILIZADOS:

http://www.terralia.com/revista14/pagina12.htm
http://www.ffp.csiro.au/research/mycorrhiza/
http://www.biologia.edu.ar/fungi/micorrizas.htm.
http://www.cdeea.com/micorrizas7.htm
http://www.ffp.csiro.au/research/mycorrhiza/ecm.html.
http://www.mag.go.cr/rev_agr/v21n01_055.pdf
www.sciencie.siu.edu/parasitic-plants/trms.html
http://www.encuentros.uma.es/encuentros55/micorrizas.html


EVALUACIÓN:

El 50% de la nota se dará a la realización del trabajo, así como la exposición del mismo como los recursos utilizados para ello.
El 50 % restante, se dará a la práctica realizada en el laboratorio, a su ejecución como también la posterior visualización de vesículas y árbúsculos.

CONCLUSIONES:

Aparte de su interés científico: estudios de tipo fisiológico en plantas, en microbiología, aplicaciones a la biotecnología en la producción comercial hortofrutícola y ornamental, son de destacar su aplicación a procesos de reforestación y de recuperación de zonas áridas y suelos degradados.
Otra de las aplicaciones punteras, es su uso en el control biológico contra agentes patógenos de la rizosfera.
Pero quizás el motivo más importante para trabajar con ellas y proporcionando mayor satisfacción a sus manipuladores es la obtención de plantas sanas y vigorosas.